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關鍵詞:DUCHEFA Biochemie B.V.
簡介：我公司全國總代理,華東地區代理DUCHEFA Biochemie B.V.專業經營進口胎牛血清、細胞因子、ELISA試劑盒、細胞、抗體、生物試劑、耗材、培養基、一抗、二抗、其產品吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高，代做ELISA實驗等。
全國總代理,華東地區代理DUCHEFA Biochemie B.V.產品涉及分子生物學、細胞生物學、細菌學、遺傳學、免疫學、生物化學、蛋白質學、細胞療、臨床應用等領域。全國總代理,華東地區代理范圍內免費運輸，如出現運輸質量問題，我們可以包退換貨。DUCHEFA Biochemie B.V.完善的庫存及供應體系以及高效穩定的純化技術，保證產品均能現貨供應和產品質量的穩定性。
品牌名稱：   DUCHEFA Biochemie B.V.

測序實驗流程：
分子克隆的相關載體：DNA段的克隆需要合適的載體，載體或是質粒，或是噬菌體，或是病毒，通常大多經過人工改造。作為載體必須具備兩條件：一是該載體在細胞內必須能自主復制，即必須具備復制原點；二是該載體必須具備適合的酶切位點，且這些酶切位點不在復制原點區域內。以上兩條，保證了載體的可繁殖性和可利用性。為了便于獲得陽隆克隆，載體上常有篩選標記，如對抗菌素的抗性，某些基因產物的顯色反應等。
服務要求： 
1、請以等形式告知我們服務的主要目的及具體要求。
2、提供外源DNA的來源及背景資料。DNA來源包括：PCR擴增產物；RT－PCR擴增產物；從其它質粒上酶切得到的DNA段等。
3、提供DNA段的電泳照片，并請標明Marker有濃度。
4、提供載體來源與背景資料。
5、注明克隆使用的酶切位點以及是否需要平端連接等。
相關材料說明： 
1、對于實驗材料中涉及病原體等危險材料不接受。
2、實驗中涉及的堿基序列請以的形式發到我中心。
3、實驗中的使用載體要盡量提供背景資料：（質粒大小，抗性，拷貝數，多克隆位點等）如果是商品化載體，請您提供生產廠家及標準名稱；如果所提供載體是您自己構建的請注明大體結構情況。
4、我中心可以提供常用的如（氨芐青霉素，氯霉素，卡那霉素）以外的抗生素需您提供。
5、您自己提供的引物如果為干品，請您標注具體的OD數，如果是液體態，請您標明濃度。
6、可以用甘油菌和穿刺菌形式郵寄菌體。（同時提供相應的質粒）；如果提供質粒，則質粒的量在4ug以上；如果提供的是PCR產物，則PCR產物量在5u以上（附上電泳圖）
7、用于提取RNA/DNA的材料要新鮮。采樣時應首先在液氮中速凍，保存在－80度的冰箱中，使用干冰運輸。
載體DNA的選擇 
分子克隆載體
①質粒:質粒是細菌染色體外遺傳因子，DNA呈環狀，大小為1-200千堿基對(kb)。在細胞中以游離超螺旋狀存在，很容易制備。質粒DNA可通過轉化引入寄主菌。在細胞中有兩種狀態，一是"緊密型";二是"松弛型"。此外還應具有分子量小，易轉化，有一至多個選擇標記的特點。質粒型載體一般只能攜帶10kb以下的DNA段，適用于構建原核生物基因文庫，cDNA庫和次級克隆。
②噬菌體DNA:常用的λ噬菌體的DNA是雙鏈，長約49kb，約含50個基因，其中50%的基因對噬菌體的生長和裂解寄主菌是必需的，分布在噬菌體DNA兩端。中間是非必需區，進行改造后組建一系列具有不同特點的載體分子。λ載體系統zui適用于構建真核生物基因文庫和cDNA庫。
M13噬菌體是一種*的載體系統，它只能侵襲具有F基因的大腸桿菌，但不裂解寄主菌。M13DNA(RF)在寄主菌內是雙鏈環狀分子，象質粒一樣自主復制，制備方法同質粒。寄主菌可分泌含單鏈DNA的M13噬菌體，又能方便地制備單鏈DNA，用于DNA順序分析、定點突變和核酸雜交。
③柯斯(Cos)質粒:是一類帶有噬菌體DNA粘性末端順序的質粒DNA分子。是噬菌體-質粒混合物。此類載體分子容量大，可攜帶45kb的外源DNA段。也能象一般質粒一樣攜帶小片段DNA，直接轉化寄主菌。這類載體常被用來構建高等生物基因文庫。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結合物 半抗原反應 半抗原載體結合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細胞質蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細胞裂解 組織提取 重組細胞因子 
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細菌克隆載體 文庫及構建 cDNA文庫 基因組文庫 噬菌體展示文庫
【酶】限制性內切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長基因 RNA cDNA合成 cDNA相關試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達】克隆基因 克隆試劑盒 克隆篩選
【表達分析】 Northern印跡分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝膠制備 蛋白電泳試劑 預制蛋白凝膠
【核酸純化】 DNA凝膠純化 DNA提取純化 PCR產物純化
技